产品货号:
KD1333
中文名称:
LacZ基因胞外表达显色试剂盒
英文名称:
LacZ extracellular Expression color rendering Kit
产品规格:
50块板
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
保存:-20℃
储存条件:常温保存,X-Gal储存液-20℃保存,有效期一年。
产品内容:
产品介绍:
本试剂盒用于EGY48酵母杂交系统中,LacZ报告基因的检测;当有互作发生,LacZ报告基因表达,生成β-半乳糖苷酶,将X-Gal切割成半乳糖和深蓝色的底物5-溴-4氯靛蓝。
筛选培养基配制:(SD/-Trp/-Ura平板)
1.请将0.5L的SD/-Trp/-Ura with Agar干粉,加入500mL的蒸馏水中,搅拌溶解;
2.115℃灭菌20min,冷却后倒板;
注意:灭菌的培养基如有剩余,可置于超净台密封保存,再次使用时微波加热溶解后倒板即可。
显色培养基配制:(SD/-Trp/-Ura/Gal/Raf/X-Gal平板)
1.组分配比,见下表;
2.根据需要按照上表称取适量SC/-Trp/-Ura Broth和Agar,加水至75mL搅拌溶解;
3.115℃灭菌20min;同时预热20%半乳糖溶液、20%棉子糖溶液、10×BU buffer至55℃左右;
4.培养基冷却到55℃左右后加入预热的上述成分以及X-gal储存液,混匀倒板。
注意:显色平板请尽快使用。3天内避光4℃保存的板子亦可以使用。
实验方法:(以EGY48-pLacZi酵母单杂交体系为例)
1.载体构建pLacZi-X &pB42AD-Y;
2.载体共转化EGY48酵母感受态细胞(参照KD0256使用说明);
3.转化产物涂布SD/-Trp/-Ura with Agar平板,28~30℃培养3~5天;
4.随机选择5个单菌落,Marker笔做好标记,挑取少量菌落做阳性克隆检测(参照KD2250使用说明);
5.挑取鉴定为阳性克隆的菌落涂布SD/-Trp/-Ura/Gal/Raf/X-Gal with Agar显色平板,28~30℃培养3~5天后观察显色反应。
相关搜索:LacZ基因胞外表达显色试剂盒,LacZ extracellular Expression color rendering Kit